Créé à l’initiative des chercheurs et médecins de l’Hôpital Necker – Enfants malades, l’Institut hospitalo-universitaire (IHU) sur les maladies génétiques Imagine développe des programmes scientifiques fondés sur une continuité entre recherche fondamentale, recherche clinique et soins innovants sur les maladies génétiques et les prédispositions génétiques aux maladies fréquentes, de l’enfance à l’âge adulte. Imagine a pour ambition d’accélérer la recherche en l’organisant au plus près du malade afin d’apporter les solutions diagnostiques et thérapeutiques attendues par les patients et leurs familles.

Le laboratoire « Maladies Génétiques cutanées  : des mécanismes physiopathologiques aux traitements » dirigé par le Pr. Alain Hovnanian recherche un(e) ingénieur d’étude (H / F) pour aider au développement de nouvelles stratégies d’édition du génome (gene editing) au moyen des nucléases CRISPR / Cas9 et la recombinaison homologue, ainsi que base et prime éditeurs dans des cellules souches de l’épiderme pour une maladie génétique cutanée sévère, l’épidermolyse bulleuse dystrophique.

Le / la candidat(e) rejoindra le laboratoire de 15 personnes, au sein de l’unité INSERM UMR 1163 à l’Institut Imagine des maladies génétiques, Paris 15ème.

MISSION ET FONCTIONS

Les missions principales du / de la candidat(e), auxquelles il / elle sera formé(e) si nécessaire, comprendront :

• Choix, clonage et manipulation des nucléases de type CRISPR / Cas9, base et prime éditeurs
• Caractérisation des ARN guides  : évaluation de l’activité et la toxicité par la méthode de Surveyor nucléase, TIDE et EditR
• Recombinaison homologue sur les kératinocytes, fibroblastes primaires et des iPSCs des patients EBDR
• Mise en culture, maintenance et manipulation des iPSCs
• Mise en culture des kératinocytes et fibroblastes humains à partir de biopsies cutanées
• Entretien des lignées et des kératinocytes et fibroblastes humains primaires (passage des cellules, congélation, décongélation, irradiation des fibroblastes 3T3 J2)
• Production de vecteurs lentiviraux
• Mise en œuvre et adaptation des techniques de biologie cellulaire et moléculaire (extraction d’ADN, d’ARN, de protéines, PCR, RT-PCR, Taqman-ddPCR, électrophorèse des acides nucléiques et protéiques, clonage, séquençage par la méthode Sanger et haut débit, FACS, immuno-histo(cyto)chimie)
• Démonstration de la fonctionnalité de l’approche par analyse de xénogreffes de peaux équivalentes corrigées (analyse immuno-histochimique et ultra-structurale de l’épiderme, de la jonction dermo-épidermique, de l’expression du collagène VII et formation des fibres d’ancrage)
• Réalisation de coupes histologiques en cryostat
• Utilisation des logiciels associés aux projets

QUALITES ET COMPETENCES

CONTRAT

Le poste est à pourvoir dès que possible pour un contrat initial d’un an possiblement renouvelable.

MODALITE DU RECRUTEMENT

Merci d’adresser votre CV, une lettre de motivation, un résumé de vos recherches et les coordonnées d’au moins 2 références à et